خاموش سازی برخی از ژن های موثر بر متابولیسم ثانویه در گونه ی توتون (nicotiana benthamiana) به روش vigs به منظور بررسی آثار فیزیولوژیکی حاصل از آن

خاموش سازی ژن القا شده توسط ویروس (vigs )، نوعی فناوری است که از سیستم دفاعی ضد ویروس در گیاهان، به عنوان ابزاری برای ژنتیک معکوس بهره می برد. این روش بسیار ساده بوده و نتایج آن خیلی زود مشخص می شود. گیاه nicotiana benthamiana یکی از مهم ترین گیاهان تیره سیب زمینی (solanaceae) است. گیاهان تیره سیب زمینی محصولاتی با فعالیت بیولوژیکی بالا از جمله آلکالوئیدهایی مانند نیکوتین و تروپان آلکالوئیدها، استروئیدها و غیره را تولید می کنند. پوترسین-n- متیل ترانسفراز یک آنزیم کلیدی در ابتدای مسیر بیوسنتز نیکوتین و تروپان آلکالوئیدها است که سنتز s-آدنوزین پوترسین را از پوترسین کاتالیز می کند. pmt در پروموتر خود دارای مناطقی است که تحت تاثیر عوامل رونویسی قرار می گیرند. دو عامل رونویسی که در توتون شناسایی شده اند از خانواده پروتئین های واجد دامنه ap2/erf بوده و شامل ntorc1 وntjap1 می باشند. ntorc1 دارای 82% تشابه با پروتئین واجد دامنه ap2/erf (nberf1) شناخته شده در benthamiana nicotiana می باشد. این عوامل رونویسی تحت تاثیر جاسمونات نیز قرار می گیرند. در این مطالعه قطعاتی از سه ژن nbpmt، ntorc1 وntjap1 به منظور خاموش سازی با استفاده از روش vigs در پلاسمید trv2 کلون شد و به درون باکتری agrobacterium tumefaciens فرستاده شد و تاثیر خاموش سازی بر روی میزان متابولیت های ثانویه مورد بررسی قرار گرفت. نتایج بدست آمده در این پژوهش نشان دهنده کارایی بالای این روش در بررسی اثرات ژن های ذکر شده در گیاه n. benthamiana بود.